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标定：取在105℃干燥至恒重的基准邻二---氢钾约0.16g，精密称定，加无水冰---20ml使溶解，加结晶紫指示液1滴，用本液缓缓滴定至蓝色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml滴定液（0.1mol/l）相当于20.42mg的邻二---氢钾。根据本液的消耗量与邻二---氢钾的取用量，算出本液的浓度，即可。

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用发酵法制取柠檬酸以1942年汤腾汉等报告为早。1952年陈声等开始用黑曲霉浅盘发酵制取柠檬酸。轻工业部发酵工业科学研究所于1959年完成了200l规模深层发酵制柠檬酸试验。

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